不銹鋼層析柱是一種常用的層析技術設備,廣泛應用于生物、化學、醫學等領域。正確裝填層析柱并進行層析操作是保證實驗成功的關鍵。
一、不銹鋼層析柱的裝填
1.選擇(ze)合適(shi)的(de)固(gu)定相(xiang):根據待(dai)分離物質(zhi)的(de)性質(zhi)選擇(ze)合適(shi)的(de)固(gu)定相(xiang)材料,如硅(gui)膠、氧化鋁(lv)等(deng)。
2.準(zhun)備固定相(xiang):將(jiang)固定相(xiang)材料(liao)研(yan)磨至合適的(de)粒徑,以提高裝(zhuang)填效果(guo)。一(yi)般情況下,粒徑越(yue)小,分(fen)離效果(guo)越(yue)好,但流速(su)會相(xiang)應(ying)降低。
3.裝填層析(xi)柱:將出口封閉,將固定相材料從進樣口加入。在裝填過(guo)程中,應(ying)保持柱內壓力(li)穩定,避免產(chan)生氣泡。
4.壓(ya)實(shi)固(gu)定(ding)相:將固(gu)定(ding)相材料裝(zhuang)填至(zhi)層(ceng)析柱后,應(ying)使用(yong)合適的(de)工具將其壓(ya)實(shi),以形成均勻(yun)的(de)床層(ceng)。壓(ya)實(shi)過程中,應(ying)注(zhu)意不(bu)要破壞(huai)固(gu)定(ding)相表面的(de)平整度。
5.平衡(heng)系統(tong):在(zai)固定(ding)相(xiang)床(chuang)層(ceng)上方加入少量的(de)平衡(heng)液(ye),使整(zheng)個系統(tong)達(da)到(dao)平衡(heng)狀態(tai),為層(ceng)析操作做好準備。
二(er)、層析(xi)操(cao)作技巧
1.樣品(pin)加(jia)載:將待分(fen)離的樣品(pin)注入頂端,使其與固定相充分(fen)接觸。加(jia)載過(guo)程(cheng)中(zhong),應保持樣品(pin)濃度均勻,避免產生(sheng)渦流(liu)。
2.加入流動相:將合適的流動相(如醇、水等)注入不銹鋼層析柱,通過壓力或重力作用,使流動相在柱內向下移動,帶動樣品向前移動。
3.控制流(liu)速(su):在層析操(cao)作過(guo)程中,應根(gen)據實驗需求控制流(liu)速(su)。流(liu)速(su)過(guo)快可能導(dao)致分離效果不佳;流(liu)速(su)過(guo)慢可能會影響實驗效率。
4.監(jian)測(ce)與收(shou)集產物:在底部連接收(shou)集管,按(an)順序收(shou)集流(liu)出(chu)的(de)各(ge)組分。同(tong)時,可以通過檢測(ce)器(qi)實(shi)時監(jian)測(ce)各(ge)組分的(de)流(liu)出(chu)情況,以便及時調(diao)整實(shi)驗(yan)參數(shu)。
5.柱清洗與再生:在層(ceng)析操作結束后,應對(dui)它(ta)進行清洗和(he)再生,以(yi)去(qu)除殘留的樣(yang)品和(he)雜質(zhi),延長(chang)柱的使用壽命。
三(san)、注意事項
1.在(zai)裝填與層析操作過程中,應(ying)避免產生氣泡,以免影響實(shi)驗結果(guo)。
2.在使用時,應遵循(xun)正確的操(cao)作順序,避(bi)免因(yin)操(cao)作不當而導致的設備損壞或(huo)實驗(yan)失敗。
3.使用完后,應將其妥善處(chu)理,避免(mian)對環境造成污染。